国内刊号:11-1759/TS
国际刊号:1002-0306
发布日期:
作者:陈少敏, 朱涵予, 刘冬梅, 许丹云, 马爱民
关键词:融合疏水蛋白,根癌农杆菌介导转化,银耳,起泡性,乳化性,
为改善疏水蛋白的性质,充分利用疏水蛋白和银耳的可食性优势,将平菇疏水蛋白基因hyd与去除终止密码子的hyd拼接,形成融合疏水蛋白H-H,并构建其表达载体pEGH-H-H。通过电击法将pEGH-H-H导入到根癌农杆菌EHA105中,并转化到银耳芽孢。转化子经潮霉素抗性筛选,PCR检测后,随机挑取10个转化子进行Southern blot,筛选获得高拷贝且能稳定遗传的转化子。实时荧光定量PCR分析显示5号转化子的疏水蛋白相对表达量是野生型的11.4倍。最后提取5号转化子中的融合疏水蛋白,经SDS-PAGE检测,证明融合疏水蛋白在银耳中成功异源表达。起泡性和乳化性实验表明,转化子融合疏水蛋白较平菇疏水蛋白有一定的提升。
来源:2018年第14期
《食品工业科技》期刊编辑部