食品工业科技

作者：周波, 杨江科

关键词：大肠杆菌,多酚氧化酶,信号肽,前导肽,结构域,“盖子”结构,

以毕赤酵母X-33作为宿主,在摇瓶水平上测定了大肠杆菌多酚氧化酶(CueO)的表达量、最适pH和最适温度,并研究了信号肽、前导肽、第三结构域以及结构域连接区域的"盖子"结构对其功能的影响。结果表明:甲醇诱导72 h后,CueO最高表达量为81.26 μg/mL,最高酶活为356.67 U/L,最适pH为2.5,最适温度为45℃。去掉CueO自身信号肽,其表达量和酶活分别提高至野生型的3.08倍和3.5倍;前导肽的缺失导致CueO的错误折叠,阻碍CueO的正常分泌;第三结构域的缺失增加了蛋白的表达,但导致CueO完全失活;结构域连接区域"盖子"结构的缺失和替换均会导致CueO丧失活性,这一发现与现有报道完全不同。本研究为实现大肠杆菌多酚氧化酶的工业化应用奠定了一定的理论基础。

来源：2019年第18期

《食品工业科技》期刊编辑部

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