食品工业科技

作者：操庆国, 郭钦, 蔡佳惠, 陈会, 贾君

关键词：黄精,外排泵抑制剂,协同抑菌,抗生素,副溶血弧菌,

为了抑制对虾养殖急性肝胰脏坏死病（AHPND）的主要病原菌副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus），本论文用药食同源的天然草本黄精和8种水产用抗生素联合抑制副溶血弧菌，通过棋盘法测定黄精和抗生素的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC）和联合抑菌效果，研究了黄精等对细菌细胞膜电导率、膜电位和存活率的作用，采用RT-PCR研究了黄精等对细菌外排泵相关基因表达的影响。结果表明，黄精和土霉素具有较好的协同抑菌效果，最佳配比为1/8 MIC黄精+1/4 MIC土霉素，此时分级抑菌浓度（fractional inhibitory concentration ，FIC）为0.38，但在羰基氰化物间氯苯腙（CCCP）的存在下，这种协同作用转为相加甚至无关作用。电导率、膜电位和碘化丙啶染色证明黄精能破坏副溶血弧菌细胞外膜，提高其渗透性，导致细胞内膜去极化，膜两侧质子梯度消失。黄精显著抑制副溶血弧菌5个外膜蛋白、5个反向协同运输子和11个RND外排转运子的表达，其中vpa0096（OmpW）下调497.51倍，vp0425（TolC）、vp2072（Na+/H+反向协同运输泵）、vp2665（Na+/Ca2+交换蛋白）、vp1092、vp0941、vp1178、vpa0344和vpa0809分别下调27.03倍、73.53、55.56、100.00、35.71、37.74、49.02和56.18倍。黄精降低TCA循环关键酶苹果酸脱氢酶（MDH）和琥珀酸脱氢酶（SDH）酶活，从而抑制副溶血弧菌体内TCA循环。土霉素是vp0425（TolC）的底物之一，黄精属于天然外排泵抑制剂，能将土霉素阻留在细胞内，提高土霉素的抑菌效果。黄精和土霉素协同作用于水产养殖的弧菌病，大幅度缩减土霉素使用浓度、残留风险和耐药性弧菌的出现，从而促进水产养殖的健康发展。

来源：2021年第13期

《食品工业科技》期刊编辑部

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