食品工业科技

作者：张晓妍, 沙沈菲, 郭丽丹, 贾爽, 周婉婷, 陈雨滢, 汪立平

关键词：嗜水气单胞菌,植物乳植物杆菌,后生元,细菌素,基因挖掘,

本文旨在筛选一株可拮抗中国大鲵源嗜水气单胞菌的后生元菌株，并对其进行抑菌特性的研究和细菌素基因簇的挖掘。以中国大鲵病原性嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila, Ah2）为指示菌，筛选一株产细菌素乳酸菌株并评估其药敏特性；采用有机溶剂萃取法初步纯化菌株产细菌素；通过pH、温度和消化酶耐受性、贮藏稳定性、抑菌谱及最小抑菌（MIC）和杀菌浓度（MBC）共六类指标评价细菌素的抑菌特性；溶血反应与细胞毒性实验测试细菌素对Ah2的抑菌效果，经扫描电子显微镜初步探究细菌素的抑菌机制；经由紫外全波长扫描定性细菌素以及Tricine-SDS-PAGE电泳测定细菌素的分子量范围；最后根据菌株的全基因组序列挖掘其潜在的细菌素基因簇（RiPPs）。结果显示，从青岛市售腐乳中筛出一株产细菌素植物乳植物杆菌M4L1（Lactiplantibacillus plantarum M4L1）。初步纯化M4L1产细菌素并命名为LP01。细菌素LP01具备良好的消化酶耐受性，且在pH2~10、?20~121 ℃和9个月贮藏期内均表现出稳定的抑菌活性，并对单增李斯特菌、弗氏柠檬酸杆菌等14株革兰氏阳性和阴性菌均有不同程度的抑制作用；另外，LP01对Ah2的MIC和MBC分别为12.94和25.88 μg/mL。经MBC浓度的LP01处理后的Ah2，溶血活性和细胞毒性均得到明显缓解；SEM观察其通过破坏Ah2的细胞壁具有抑制或杀伤作用。LP01在波长200~220 nm处的肽类特征吸收峰显著，电泳后条带显示其分子量在3.3~4.0 kDa，LP01为小分子肽类细菌素。此外，基因注释到M4L1有2个细菌素基因簇（RiPPs），对应产物分别为Plantaricin K和Plantaricin E，均属于植物乳杆菌II类细菌素。菌株M4L1不仅含有多种抗菌物质相关基因簇，而且其细菌素LP01具备了优良的抑菌性能，能有效抑制多种水产病原菌、食物腐败菌及食源性致病菌等。产细菌素植物乳植物杆菌M4L1作为一株潜在的后生元菌株具有较好的应用前景。

来源：2022年第17期

《食品工业科技》期刊编辑部

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