食品工业科技

作者：管桐, 高丽莎, 隋得志, 米佳, 王斌胜

关键词：天麻素,细胞衰老,神经炎症,SIRT3,D-半乳糖,

目的：探讨天麻素对D-半乳糖诱导的BV2细胞衰老的保护作用及机制。方法：使用不同浓度（10、20、30和40 μg/mL）的D-半乳糖刺激BV2细胞24 h，建立细胞衰老模型，并用CCK-8法筛选出D-半乳糖的最佳造模浓度；实验分为4组：正常组、模型组、Silent mating type information regulation 2 homolog 3（SIRT3）抑制剂+天麻素组和天麻素组；用CCK-8法检测不同浓度（10、20、30、40和50 μmol/L）的天麻素对D-半乳糖刺激的BV2细胞活力的影响，并筛选出最佳的天麻素浓度；使用β-半乳糖苷酶（Senescence β-Galactosidase，SA-β-Gal）染色检测细胞衰老面积；使用生化法检测各组细胞活性氧（Reactive oxygen species，ROS）水平；使用Enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）法检测各组细胞神经炎症因子IL-1β（Interleukin 1β，IL-1β）、IL-6（Interleukin 6，IL-6）和TNF-α（Tumor necrosis factor α，TNF-α）水平；使用免疫荧光法检测各组细胞SIRT3荧光强度；使用Western Blot法检测细胞SIRT3、P16和P21的蛋白表达水平。结果：30 μg/mL的D-半乳糖刺激BV2细胞活力极显著降低（P<0.01），引起BV2细胞中SA-β-Gal染色面积和衰老蛋白P16和P21表达极显著增加（P<0.01），细胞中ROS水平和炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平极显著增高（P<0.01），细胞内SIRT3蛋白表达极显著降低（P<0.01）。而30 μmol/L天麻素能极显著提高D-半乳糖刺激的BV2细胞活力（P<0.01），并且极显著降低细胞SA-β-Gal染色面积和衰老蛋白P16和P21表达水平（P<0.01），极显著降低ROS水平和神经炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平（P<0.01），极显著提高细胞内SIRT3蛋白荧光强度和表达水平（P<0.01）。结论：天麻素能够提高D-半乳糖刺激的BV2细胞活力，改善BV2细胞衰老染色和衰老蛋白表达，并降低ROS水平和减缓炎症反应，这可能与天麻素提高SIRT3蛋白表达有关。

来源：2022年第19期

《食品工业科技》期刊编辑部

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