食品工业科技

作者：马文杰, 钟裔, 陆兆新, 张平, 陈诗蕾, 秦淼, 吕凤霞, 赵海珍, 别小妹

关键词：BacillomycinD,丙酮酸,丙酮酸激酶,乙酰辅酶A合成酶,过表达,调控因子,

目的：本文主要研究外源添加丙酮酸和过表达丙酮酸激酶（pyk）、乙酰辅酶A合成酶（acs）对Bacillomycin D合成的影响及调控作用。方法：本研究以B.amyloliquefaciens fmbJ为出发菌株，首先通过HPLC检测了外源添加不同浓度的丙酮酸对Bacillomycin D产量的影响，并通过RT-PCR检测了丙酮酸在此过程中的调控作用。然后通过电转化的方法构建了丙酮酸激酶和乙酰辅酶A合成酶的诱导型过表达菌株B.amyloliquefaciens fmbJ-pyk、fmbJ-acs，并研究了二者在不同浓度IPTG诱导下的Bacillomycin D产量。结果：0.075%的丙酮酸可将Bacillomycin D产量提高至对照组的1.41倍，Bacillomycin D合成基因的上调也证实了这一提高作用。此外，丙酮酸能够上调comA、comP、comQ、sigH、sigM、degU、degQ、spo0A、codY等调控因子的表达，下调rapC和abrB的表达，并促进乙酰辅酶A合成酶的表达，最终共同促进Bacillomycin D的合成。在50 mg/L的IPTG的诱导下，fmbJ-acs和fmbJ-pyk的Bacillomycin D产量也分别提高至fmbJ的1.16和1.34倍。结论：本研究发现外源添加丙酮酸以及过表达丙酮酸激酶和乙酰辅酶A合成酶可以促进Bacillomycin D的合成，揭示了丙酮酸在Bacillomycin D合成中的调控作用，为推进Bacillomycin D高效生产提供了新的研究思路。

来源：2022年第22期

《食品工业科技》期刊编辑部

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