食品工业科技

作者：贾宝珠, 何镇熹, 黄心洳, 邱芷靖, 郭琳苑, 袁钰佩, 王碧蔓, 罗林

关键词：氮掺杂碳点,荧光探针,荧光内滤效应,碱性磷酸酶,鲜牛奶,

研究建立一种以氮掺杂碳点（Nitrogen-carbon dots，N-CDs）为荧光探针，可快速、准确、灵敏检测鲜牛奶中碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP）的荧光分析方法。采用水热法，用乙二胺为氮源和邻苯二酚为碳源制备一种绿色荧光N-CDs，并采用透射电子显微镜（TEM）、紫外可见吸收光谱（UV-vis）、X射线电子能谱（XPS）和傅里叶红外光谱（FT-IR），对所合成的材料表面形貌、表面基团及光吸收特性进行表征，并通过对照试验对利用N-CDs构建检测ALP荧光分析方法的可行性进行验证。以检测体系中工作缓冲液的pH、底物硝基苯磷酸二钠（Disodium p-nitrophenyl phosphate，PNPP）的浓度、酶促反应时间为单因素，优化检测ALP的最佳条件，并建立相应的标准曲线。结果表明，材料表征结果也与以往报道的相符，N-CDs合成成功。最佳工作缓冲液为Tris-HCl（20 mmol/L，pH10），最佳PNPP浓度为1 mmol/L，最佳酶促反应时间为50 min。在最优条件下，ALP的活性浓度与N-CDs的荧光强度变化建立良好的线性关系，线性回归方程为：Y=15397.05X+70344.46（R2=0.995），线性范围在0.01~25 U/L，检测限（LOD）为0.001 U/L（S/N=3）。在两种鲜牛奶中添加回收率在100.1%~107.2%之间，变异系数小于14.3%，表明该方法具有较好的准确性和可靠性。本研究为鲜牛奶中ALP的检测提供了一种准确高效的方法。

来源：2023年第17期

《食品工业科技》期刊编辑部

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