食品工业科技

作者：刘子琦, 刘正宇, 郭银虹, 王鸿飞, 姚波

关键词：杂合抗菌肽,NK-LPd,设计,表达,抑菌活性评价,

目的：了解杂合抗菌肽NK-LPd的抑菌活性，探讨进一步开发潜力。方法：用两个甘氨酸作接头连接NK-lysin和Piscidin的活性片段，生物信息学技术预测杂合抗菌肽的理化性质和功能结构，根据毕赤酵母（Pichia pastoris）的密码子偏好性优化杂合抗菌肽NK-LPd基因序列，重叠延伸聚合酶链式反应（gene splicing by overlap extension polymerase chain reaction，SOE-PCR）扩增基因并与分泌型表达载体pPIC9K连接，通过化学法将其转化至毕赤酵母KM71感受态细胞中，经0.5%甲醇诱导表达和亲和纯化后获得杂合抗菌肽NK-LPd，评价其抗菌活性。结果：成功构建了KM71/pPIC9K-NK-LPd，经诱导表达5 d后上清液中获得了相对分子质量约6 kDa的表达产物，与预期大小相符；抗菌活性实验表明，NK-LPd对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有较强的抑菌活性，与母体肽相比，杂合抗菌肽NK-LPd的抑菌活性显著增强。结论：设计并在毕赤酵母KM71中分泌表达了杂合抗菌肽NK-LPd，其抑菌活性优于母体肽。本研究可为新型杂合抗菌肽的设计和生产提供技术参考。

来源：2023年第18期

《食品工业科技》期刊编辑部

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