食品工业科技

作者：薛常鲁, 张鹏飞, 白丽君, 肖功年, 魏培莲

关键词：酿酒酵母,豆血红蛋白,启动子优化,异源表达,蛋白质印迹,

豆血红蛋白是一种植物源血红蛋白，在植物蛋白肉加工中可作为重要的风味催化剂和着色剂，大大增加植物蛋白肉的拟真性。为实现豆血红蛋白在食品级微生物中的异源表达，将携带豆血红蛋白LBC2基因的质粒PESC-TRP转入酿酒酵母CEN.PK2-1C中，通过添加kozak序列促进其翻译，并进一步对启动子序列进行选择，以提高豆血红蛋白表达量。对重组菌株进行发酵，用Western blot分析LegH蛋白表达水平。结果显示，诱导型启动子GAL1,10较三种组成型启动子TEF1、ADH1、GAP在表达LegH能力上具有显著优势，较产量最低的ADH1启动子提升了3.93倍。在组成型启动子中，TEF1启动子能力较优，是ADH1启动子的2.91倍，是GAP启动子的1.2倍。最后，利用Ni柱亲和层析对蛋白进行浓缩纯化，测得LegH发酵浓度为2.79 mg/L。本研究成功实现了豆血红蛋白在酿酒酵母中的异源表达，经后续优化有可能成为豆血红蛋白异源表达的又一途径。

来源：2023年第20期

《食品工业科技》期刊编辑部

查看食品工业科技杂志2023年第20期