食品工业科技

作者：向芷璇, 关乐颖, 李敬, 闫巧娟, 江正强

关键词：多粘类芽孢杆菌,<i>β</i>-半乳糖苷酶,酶学性质,适冷性,低聚半乳糖,

目的：本实验旨在挖掘一个适冷性新型β-半乳糖苷酶，为低温生产低乳糖乳制品或合成低聚半乳糖（Galactooligosaccharides，GOS）提供基础。方法：从多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）基因组中克隆一个β-半乳糖苷酶（PpBgal42A）基因，构建重组表达质粒pET-28a-PpBgal42A在大肠杆菌BL21（DE3）中表达，经亲和层析纯化后研究重组β-半乳糖苷酶的酶学性质，利用高效液相色谱检测各糖分浓度，以GOS转化率为指标，评价PpBgal42A的转糖苷能力。结果：PpBgal42A与酸热脂环酸芽孢杆菌（Alicyclobacillus acidocaldarius）来源的糖苷水解酶42家族β-半乳糖苷酶同源性最高，为59.9%。纯化后，PpBgal42A的比活力为163.7 U/mg，分子量约为79 kDa。其最适pH和温度分别为pH7.5和35 ℃，在pH7.0~9.5范围内和4~35 ℃以下保持稳定，50 ℃时快速失活，35 ℃时的半衰期为1777 min。PpBgal42A利用350 g/L乳糖于30 ℃反应6 h后合成GOS的转化率为31.6%。结论：PpBgal42A是一个适冷性新型β-半乳糖苷酶，可水解乳糖并合成低聚半乳糖，具有潜在应用价值。

来源：2023年第22期

《食品工业科技》期刊编辑部

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