食品工业科技

作者：蒲元浩, 彭凯歌, 刘晓宇, 孟庆泳, 赵芳坤, 桑亚新

关键词：葡聚糖蔗糖酶,葡聚糖,胞外多糖,食品级生产,重组表达,

为研究葡聚糖在乳酸菌中的合成情况以及结构分析，本研究将葡聚糖蔗糖酶DsrB与带有SP45分泌信号肽的乳酸乳球菌表达载体pNZ8148质粒载体进行连接，电转入乳酸乳球菌NZ9000中进行异源表达。经由一系列醇沉、三氯乙酸去除蛋白质、二次醇沉、透析以及纯化等步骤得到多糖溶液。采用高效液相色谱法检测单糖组成；利用HPSEC测定葡聚糖的分子量；通过傅里叶红外技术、核磁共振技术以及扫描电镜分析多糖的结构并观察多糖表面特征。结果表明，将葡聚糖蔗糖酶在乳酸菌中进行表达，在蔗糖浓度为10%的条件下，葡聚糖产量为10.54 g/L；单糖组成显示仅含有葡萄糖一种单糖；胞外多糖分子量测定结果为2.4×106 Da；由傅里叶红外和核磁联合表明体外合成的胞外多糖仅含有α-(1,6)糖苷键；扫描电镜表示胞外多糖表面呈现为多孔状结构。在乳酸菌中异源表达，实现了葡聚糖的食品级生产，为葡聚糖于食品中应用提供了理论基础。

来源：2024年第18期

《食品工业科技》期刊编辑部

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