国内刊号:11-1759/TS
国际刊号:1002-0306
发布日期:
作者:李鹏, 刘兰, 王通, 黄筱萍
关键词:假肠膜明串珠菌,全基因组测序,D-乳酸,D-乳酸脱氢酶,酶学性质,酶动力学,
假肠膜明串珠菌HL64合成高光学纯度D-乳酸,然而,关键D-乳酸脱氢酶尚不明晰。本文旨在通过全基因组测序,鉴定关键D-乳酸脱氢酶及其酶学性质,为进一步改造假肠膜明串珠菌HL64合成D-乳酸提供理论依据。半定量PCR初步确定关键D-乳酸脱氢酶,克隆该基因,进行体外表达与纯化,深入研究相关酶学性质。结果表明LDH2(OYT93_08575)编码关键D-乳酸脱氢酶,其最适pH和反应温度分别是pH8和30 ℃。LDH2对丙酮酸及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的Km值分别为0.578 mmol/L及0.275 mmol/L,对丙酮酸的Kcat及Kcat/Km值分别为45.04 s?1及7.88×104 L/(mol·s),表明LDH2对丙酮酸具有较高催化效率。除了将丙酮酸作为底物以外,LDH2对草酰乙酸及苯丙酮酸也具备一定的催化能力。
来源:2025年第12期
《食品工业科技》期刊编辑部